技術(shù)文章
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不同組織RNA提取原理是將細(xì)胞裂解,釋放出RNA,并通過不同方式去除蛋白,DNA等雜質(zhì),最終獲得高純度RNA產(chǎn)物的過程。那么你知道常見的RNA提取方法有什么嗎?讓我們一起來看看吧!一、酚氯仿抽提(有機(jī)試劑抽提)原理:將被裂解的生物樣本,混勻離心分相以后,RNA在上層水相,DNA,蛋白質(zhì)在中間層,下層有機(jī)相。收集水相加入乙醇或異丙醇可沉淀RNA,漂洗后得到RNA。優(yōu)點(diǎn):得率高、可提取到含miRNA和其他小RNA在內(nèi)的總RNA。缺點(diǎn):用到苯酚、氯仿等有毒試劑。二、硅膠柱法抽提原理...
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實(shí)驗(yàn)室工作中,經(jīng)常會需要用到純化的DNA,這時我們通常需要使用一個商業(yè)的DNA提取試劑盒對目的DNA進(jìn)行分離純化。那么我們該如何選擇合適的DNA提取試劑盒呢?讓我們一起來看看吧!一、試劑盒組分目前大多數(shù)DNA提取試劑盒遵循相同的基本步驟:裂解,柱純化,洗滌雜質(zhì),柱洗脫。然而,不同的盒子在完成每個步驟的方式上有很大的不同。二、使用的樣本類型不同的DNA來源有不同的試劑盒,從實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的細(xì)胞,到臨床樣本,土壤樣本,甚至指紋,也有許多專門用于某些應(yīng)用的試劑盒。例如,土壤中的腐殖酸或...
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如今,大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室都使用商業(yè)DNA提取試劑盒,這些試劑盒使用硅膠自旋過濾法來獲得高質(zhì)量的DNA。這些可以快速有效地純化DNA(或RNA)。那么DNA提取試劑盒的原理是什么呢?讓我們一起來看看吧!一、RNA和DNA提取裂解:裂解公式可能因您要提取DNA還是RNA而異,但共同點(diǎn)是含有高濃度離液鹽的裂解緩沖液。Chaotropes(離液劑)的作用:Chaotrope會破壞氫鍵及疏水間的相互作用。離液鹽包括鹽酸胍、硫氰酸胍、尿素和高氯酸鋰。洗滌劑:除了離液劑外,裂解緩沖液中通常還有一...
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你知道ELISA試劑盒的原理是什么嗎?讓我們一起來看看吧!1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測定(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)用于IgG定量測定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測定方法。Elisa試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:Elisa檢測試劑盒、ElisaKit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,Elisa生物試驗(yàn)...
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根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀及檢測的具備條件的不同,所使用的檢測方法也不同,那么ELISA檢測方法有哪些呢?讓我們一起來看看吧!一、雙抗體夾心法測抗原雙抗體夾心法是將特異性抗體結(jié)合到固相載體上形成固相抗體,然后和待測血清中的響應(yīng)抗原結(jié)合形成免疫復(fù)合物,洗滌后加酶標(biāo)記抗體,與免疫復(fù)合物中的抗原結(jié)合形成酶標(biāo)抗體-抗原-固相抗體復(fù)合物,加底物顯色,判斷抗原的含量。二、競爭法首先將特異性抗體包被于固相載體表面,經(jīng)洗滌后分成兩組:一組加酶標(biāo)記抗原和被測抗原的混合液,另一組只加酶標(biāo)記抗原,...
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