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如何利用流式進(jìn)行細(xì)胞凋亡（Cell Apoptosis）分析

磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine,PS)是一種細(xì)胞膜活性物質(zhì)，正常細(xì)胞中，其位于細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層內(nèi)側(cè),在細(xì)胞凋亡的早期，PS可從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面。凋亡早期：磷脂膜(PS)外翻，但是細(xì)胞膜保持完整性，因此PI（與DNA結(jié)合）染色為陰性。AnnexinV是一種磷脂結(jié)合蛋白，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力，可以與凋亡早期外翻的磷脂膜(PS)結(jié)合。凋亡中晚期：磷脂膜(PS)外翻，但是細(xì)胞膜被破壞，AnnexinV和PI分別與磷脂酰絲氨酸和DNA結(jié)合。壞死細(xì)胞...

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Lipo3000細(xì)胞轉(zhuǎn)染的實驗步驟及注意事項

細(xì)胞轉(zhuǎn)染常用的轉(zhuǎn)染試劑很多，其中，Lipo3000深受廣大科研工作者的喜愛，那我們來看看Lipo3000細(xì)胞轉(zhuǎn)染的實驗步驟及注意事項吧！一、實驗前準(zhǔn)備Lipofectamine™3000轉(zhuǎn)染試劑（ThermoFisher）、Opti-MEM（可以用無血清的培養(yǎng)基代替）二、實驗步驟1.接種細(xì)胞，使其在轉(zhuǎn)染時達(dá)到70–90%匯合度。注：對于HEK293，6孔板一般鋪50萬個細(xì)胞左右。對于PC9,24孔板一般鋪5-10萬個細(xì)胞。由于不同細(xì)胞，生長狀況不太一樣，需要根據(jù)情...

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影響細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的因素有哪些？

隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展，細(xì)胞轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究真核細(xì)胞基因功能的常規(guī)工具。常用于研究基因功能、基因表達(dá)調(diào)控、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學(xué)試驗中，其應(yīng)用非常廣泛。既然細(xì)胞轉(zhuǎn)染如此重要，那影響細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的因素有哪些？讓我們一起來看看吧！一、轉(zhuǎn)染試劑不同細(xì)胞系轉(zhuǎn)染效率通常不同，因此在轉(zhuǎn)染實驗前需要根據(jù)細(xì)胞特性選擇合適的轉(zhuǎn)染試劑?？梢酝ㄟ^已發(fā)表文獻(xiàn)和轉(zhuǎn)染試劑提供的已成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株來進(jìn)行選擇。二、細(xì)胞狀態(tài)轉(zhuǎn)染前細(xì)胞活力和總體健康狀況是轉(zhuǎn)染產(chǎn)生變異性的重要來源。一般建...

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細(xì)胞轉(zhuǎn)染常見方法之原理、特點及實驗步驟

隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展，細(xì)胞轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究真核細(xì)胞基因功能的常規(guī)工具。常用于研究基因功能、基因表達(dá)調(diào)控、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學(xué)試驗中，其應(yīng)用非常廣泛。目前實驗室最為常用的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法有兩種：脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法和電穿孔法，接下去分別介紹這兩種方法的原理、特點和實驗步驟。一、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法1.原理陽離子脂質(zhì)體表面帶正電荷，能與核酸的磷酸根通過靜電作用，將DNA分子包裹入內(nèi)，形成DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物，也能被表面帶負(fù)電的細(xì)胞膜吸附，再通過融合或細(xì)胞內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞（見下...

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Aeonian Biotech抗體好嗎？

AeonianBiotech，一家荷蘭的生物技術(shù)公司，以抗體的研發(fā)、生產(chǎn)、銷售和服務(wù)為主營業(yè)務(wù)。AeonianBiotech主營產(chǎn)品為抗體，AeonianBiotech抗體好嗎？市場接受度如何呢？AeonianBiotech的特色主要是：重組兔和重組小鼠抗體、小鼠單克隆抗體和多克隆磷酸特異性兔抗體等，重組抗體由參與與靶蛋白特異性結(jié)合的可變區(qū)的DNA序列定義?？贵w不再由傳統(tǒng)的雜交瘤產(chǎn)生，而是在轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系中瞬時或穩(wěn)定表達(dá)。隨著時間的推移，這種抗體的特性和性能不會因雜交瘤中常見的...

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