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【干貨】一文了解vero細(xì)胞培養(yǎng)全流程

Vero細(xì)胞系是連續(xù)非整倍體細(xì)胞，連續(xù)細(xì)胞系可以經(jīng)過多次分裂而不衰老，非整倍體是指細(xì)胞中的染色體數(shù)目與通常的不同。與其它普通哺乳動物細(xì)胞不同，Vero細(xì)胞還有干擾素分泌缺陷的特點(diǎn)，當(dāng)被病毒感染時，它不能分泌干擾素，但它仍然具有α/β-干擾素的受體，所以對于其它來源的干擾素仍有正常的反應(yīng)。一、基本信息細(xì)胞名稱：Vero非洲綠猴腎細(xì)胞細(xì)胞別稱：VERO;Verdareno細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣生長特性：貼壁生長組織來源：正常腎培養(yǎng)基：MEM+10%FBS+1%PS生長條件：①氣相：...

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原代細(xì)胞培養(yǎng)的分離注意事項(xiàng)有什么？

分離是原代細(xì)胞培養(yǎng)的重要步驟之一，那么你知道原代細(xì)胞培養(yǎng)的分離注意事項(xiàng)有什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、組織塊培養(yǎng)法1.組織塊接種后的前3天，在觀察和移動的過程中，注意不要引起液體的振蕩。要避免經(jīng)常翻動和振動，否則組織塊不易附著于瓶壁上或附著后也會脫落飄起。2.加入的培養(yǎng)液不宜過多，避免浸泡的組織塊受輕微的波動而脫落下來。3.當(dāng)細(xì)胞向外遷徙出來后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的細(xì)胞，它們產(chǎn)生的有毒物質(zhì)會影響原代細(xì)胞的生長。4.為促進(jìn)組織塊盡快粘貼在培養(yǎng)瓶皿上，可以在種植前...

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原代細(xì)胞取材的注意事項(xiàng)有哪些？

取材作為原代細(xì)胞培養(yǎng)過程中至關(guān)重要的一步，那么原代細(xì)胞取材的注意事項(xiàng)有哪些呢？讓我們一起來看看吧！一、皮膚和粘膜主要取皮片，面積一般2~4平方厘米。二、內(nèi)臟和實(shí)體瘤1.無菌環(huán)境；2.熟悉所需組織的類型和部位；3.要避開破潰、壞死液化部分，以防污染，盡量去除混雜的結(jié)締組織。三、血液細(xì)胞一般多抽取靜脈外周血，或從淋巴組織中(如脾、扁桃體、胸腺、淋巴結(jié)等)分離細(xì)胞，取材時應(yīng)注意抗凝。四、骨髓、羊水、胸/腹水細(xì)胞嚴(yán)格無菌，注意抗凝，還要盡快分離培養(yǎng)，離心后，用無鈣、鎂PBS洗兩次，再...

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WB實(shí)驗(yàn)常見問題有哪些？如何解決？

WesternBlot雖是實(shí)驗(yàn)室zui常用的蛋白分析技術(shù)，但是由于它步驟繁瑣、操作流程長、影響因素多，所以導(dǎo)致在實(shí)驗(yàn)過程中會遇到各式各樣的問題，那么你知道WB實(shí)驗(yàn)常見問題有哪些呢？該如何解決呢？讓我們一起來看看吧！一、目標(biāo)條帶沒有信號原因分析：1.樣品中可能含有蛋白酶，使蛋白樣品分解成小分子。2.目標(biāo)蛋白濃度過低（低于檢測下線）。3.轉(zhuǎn)膜時間太短導(dǎo)致目標(biāo)蛋白沒有充分轉(zhuǎn)移到膜上，或者轉(zhuǎn)膜時間過長導(dǎo)致樣品轉(zhuǎn)穿。4.一抗的特異性不佳，導(dǎo)致一抗無法識別目標(biāo)蛋白。解決方法：1.添加蛋白...

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你知道RNA提取的實(shí)驗(yàn)步驟是什么嗎？

RNA是目前發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)生物功能zui豐富多樣的生物大分子，同時是DNA與蛋白質(zhì)信息傳遞的橋梁，因此完整RNA的提取和純化是功能基因組時代的重要手段，那么你知道RNA提取的實(shí)驗(yàn)步驟是什么嗎？讓我們一起來看看吧！以Trizol法提取組織細(xì)胞為例：1.提取細(xì)胞RNA時，先離心沉淀細(xì)胞，每5~106個細(xì)胞加1mlTrizol后，反復(fù)用槍吹打或劇烈震蕩以裂解細(xì)胞；2.將上述組織或細(xì)胞的Trizol裂解液轉(zhuǎn)入EP管中，在室溫15~30℃下放置5分鐘；3.在上述EP管中，按照每1mlTri...

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