Elabscience谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)比色法測試盒適用于檢測血清（漿）、動物組織、細(xì)胞等樣本的 ALT 活力。

在37℃、pH7.4 條件下，谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）催化丙氨酸與α-酮戊二酸之間的氨基轉(zhuǎn)換反應(yīng)，生成丙酮酸和谷氨酸，反應(yīng)時(shí)間過后，加入苯肼，與丙酮酸生成苯腙，苯腙在堿性條件下呈紅棕色。

實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵點(diǎn)

① 加樣或者試劑時(shí)，EP管的管壁上不能掛液。

② 樣本須新鮮（血清樣本2-8℃保存7天，-25℃保存20天）。

操作步驟

標(biāo)曲部分

① 標(biāo)準(zhǔn)管：將 10 mLEP 管編號 A、B、C、D、E、F，每個(gè)編號兩個(gè)，分別加入 0.1 mL試劑一。

② 向①中從A管到F管分別加入0、0.05、0.10、0.15、0.20、0.25 mL的試劑二。

③ 向②中從A管到F管分別加入0.50、0.45、0.40、0.35、0.30、0.25 mL的試劑三。

④ 向③中，加入 0.5 mL 試劑四，混勻后，37℃孵育20 min。

⑤ 向各管加入 5 mL 試劑五工作液。

⑥ 室溫靜置 10 min，505 nm，1 cm 光徑石英比色皿，雙蒸水調(diào)零，測定各管吸光度值。

注：以絕對OD值（各管OD值-A管OD值）為橫坐標(biāo)，相對應(yīng)的卡門氏單位（0、28、57、97、150、200）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

樣本部分

① 向測定管中加入 0.1 mL待測樣本。

② 向測定管、對照管中加入0.5 mL 已經(jīng)預(yù)溫10 min的試劑三。

③ 混勻后，37℃孵育30 min。

④ 向測定管和對照管中，加入0.5 mL 試劑四。

⑤ 向?qū)φ展芗尤耄?.1 mL待測樣本。

⑥ 混勻后，37℃孵育20 min。

⑦ 向各管加入 5 mL試劑五工作液。

⑧ 室溫靜置 10 min，505 nm，1 cm 光徑石英比色皿，雙蒸水調(diào)零，測定各管吸光度值。

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