胎牛血清如何解凍

胎牛血清在生物醫(yī)學(xué)研究，以及細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域中，應(yīng)用廣泛。胎牛血清含有豐富的生長因子、蛋白質(zhì)和其他生物分子，對細(xì)胞生長和增殖具有重要作用。使用胎牛血清，先要將其解凍融化。融化胎牛血清時(shí)采取正確的方法非常重要，不正確的解凍過程可能會(huì)導(dǎo)致?lián)p壞或降低血清的有效性，影響到實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性和準(zhǔn)確性。那么你知道胎牛血清該如何解凍嗎？讓我們一起來看看吧！

一、解凍方法

胎牛血清中珍貴的生長因子等活性物質(zhì)，它們在解凍過程中，有著與細(xì)胞復(fù)蘇類似的經(jīng)歷，都需要快速解凍才能最da程度地保留生物活性。

4℃過夜這樣的長時(shí)間處理，很有可能會(huì)導(dǎo)致一部分的損失，影響細(xì)胞生長，為了更好地保留胎牛血清中的活性成分，使細(xì)胞培養(yǎng)更穩(wěn)定，我們推薦使用三步法解凍胎牛血清。

 如果是儲存在-80℃的胎牛血清，則需提前幾天先轉(zhuǎn)移至-20℃冰箱中（至少24小時(shí)），再使用三步法溶解，避免溫差過大使血清失活。

徹di解凍胎牛血清后，可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，將其分裝，保證每一份夠一次使用量即可，比如：25ml/管、50ml/管等。密封好后趕緊放回-20℃冰箱繼續(xù)儲存。需要配制培養(yǎng)基的時(shí)候，再從-20℃冰箱中取出一管來解凍使用，可以有效避免反復(fù)凍融的問題（遵循現(xiàn)用現(xiàn)配、現(xiàn)配現(xiàn)解凍的原則）。配好的培養(yǎng)基可以放到4℃冰箱進(jìn)行儲存。

二、常見問題

1. 胎牛血清有絮狀沉淀：

把血清置于37℃中過久，或者沒有階梯解凍，還有解凍水浴時(shí)振蕩不足導(dǎo)致局部溫差過大等原因，都會(huì)使血清產(chǎn)生一些沉淀。

正確的處理方法：可以等待其自然沉降，然后取上清液使用。若比較急用、或者絮狀沉淀過于分散以至于無法取上清，可以2000～3000rpm離心5min。不推薦使用過濾法，血清的蛋白容易導(dǎo)致濾膜堵塞。熱滅活之后的血清更容易產(chǎn)生沉淀。

2. 熱滅活？血清熱滅活是什么，有必要熱滅活嗎？

血清熱滅活主要是為了除去對熱敏感的補(bǔ)體。

補(bǔ)體是廣泛存在于人和脊椎動(dòng)物體血清及組織液中，不耐熱，活化后具有酶活性、可介導(dǎo)免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)的一類蛋白質(zhì)。補(bǔ)體的作用包括但不限于調(diào)理吞噬、裂解細(xì)胞、介導(dǎo)炎癥、免疫調(diào)節(jié)和清除免疫復(fù)合物等。但由于胎牛胎齡8個(gè)月以下，尚未形成完善的補(bǔ)體系統(tǒng)，對免疫實(shí)驗(yàn)的影響較小，而熱滅活血清反而會(huì)使血清中的很多重要微量生長因子分解流失，因此大部分實(shí)驗(yàn)不推薦熱滅活血清。

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